人ELISA試劑盒檢測(cè)原理：往預(yù)先包被肥胖抑制素抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的肥胖抑制素呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度，計(jì)算樣品濃度。 人ELISA試劑盒使用規(guī)范：
1、酶標(biāo)包被板開封后如未用完，應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存。
2、建議所有的標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對(duì)照都做雙份檢測(cè)，取平均值，以減小實(shí)驗(yàn)誤差。
3、實(shí)驗(yàn)嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
4、牢記樣本已經(jīng)稀釋5倍，計(jì)算結(jié)果乘以5才是樣本實(shí)際濃度。
5、底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。
6、若顯色過(guò)淺，可適當(dāng)延長(zhǎng)底物溫育時(shí)間。
7、本試劑盒定量范圍為0.1-200ng/ml，超過(guò)此范圍，為標(biāo)準(zhǔn)曲線延伸計(jì)算所得，不做為準(zhǔn)確定量結(jié)果，請(qǐng)用特殊稀釋液稀釋后測(cè)定準(zhǔn)確結(jié)果（0.1-200ng/ml范圍內(nèi)），乘以總稀釋倍數(shù)即為樣本zui終濃度。
8、為避免交叉污染，標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對(duì)照每加一個(gè)就要更換一次吸頭；酶標(biāo)工作液、樣本稀釋液和底物等公共組分，要懸臂加樣，不得碰到微孔；不得重復(fù)使用封板膜。
9、試劑盒保質(zhì)期內(nèi)使用，不同批號(hào)的試劑不得混用。
